本试剂盒仅限于科学研究用途,不得用于医学诊断。以下是小鼠多瘤病毒(PY)Elisa试剂盒的使用说明。
检测原理
本试剂盒采用双抗体一步夹心法进行酶联免疫吸附试验(ELISA)。首先,在已经包被adropin(AD)抗体的微孔中依次添加样本、标准品及HRP标记的检测抗体,随后进行温育并彻底洗涤。应用底物TMB进行显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化为蓝色,随后在酸的作用下变为黄色。颜色的深浅与样品中adropin(AD)的含量呈正相关。最后,利用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),以计算样品浓度。
样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用无热原及内毒素的试管。操作时避免细胞刺激,收集血液后以3000转/分钟离心10分钟,快速小心地分离血清与红细胞。
2. 血浆:使用EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝,3000转/分钟离心30分钟后取上清液。
3. 细胞上清液:以3000转/分钟离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水搅拌均匀,3000转/分钟离心10分钟后取上清。
5. 保存:如无法及时检测样本,请按一次用量分装并冻存于-20℃,避免反复冻融。解冻时应在室温下完全解冻并确保样品均匀。
自备物品及操作注意事项
请注意,试剂盒中标准品(S0-S5)的浓度依次为:0、25、50、100、200、400pg/mL。
试剂的准备:将20×洗涤缓冲液以1:20比例稀释,即1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。
洗板方法与结果判断
绘制标准曲线:在Excel中,以标准品浓度为横坐标,对应的OD值为纵坐标,绘制标准品线性回归曲线,根据曲线方程计算各样本的浓度值。
尊龙凯时对本试剂盒的性能不做任何形式的保证,使用过程中请遵循实验室操作规范。