血清是血液凝固后,去除纤维蛋白后从血浆中分离出的一种淡黄色透明液体,也可以指已去除纤维蛋白的血浆。血清的主要功能在于提供生物体所需的基本营养物质、激素及各种生长因子,同时也提供结合蛋白,以及促进细胞附着和伸展的因子,以帮助细胞贴壁并增强其机械稳定性。此外,血清在细胞培养过程中还起到一定的保护作用。
血清在细胞培养中的重要作用
在细胞培养中,血清提供细胞生长所需的各种生长因子、激素、蛋白质以及促进细胞贴壁和铺展的因子。此外,在细胞传代过程中,血清中的蛋白酶抑制剂也能起到保护细胞的作用。胎牛血清(FBS)是最常用的血清类型,其他类型的血清包括小牛血清、成牛血清、马血清、羊血清、鸡血清及兔血清等,各种血清的营养成分各不相同,适用于不同类型的细胞培养。
血清的主要功能
血清是细胞培养中使用最多的天然培养基,富含细胞生长所需的营养成分,其重要功能包括:
- 提供维持细胞指数生长的激素和基础培养基几乎没有或极少的低分子营养物质。
- 提供结合蛋白,识别并调节维生素、脂类、金属及其他激素的活性。
- 在某些情况下,结合蛋白能与有毒金属及致病质结合,从而发挥解毒作用。
- 提供细胞贴壁和在塑料培养基质上生长所需的因子。
- 作为酸碱度的缓冲剂。
- 提供蛋白酶抑制剂,以保护细胞在传代过程中免受损害。
血清的不稳定性及其问题
尽管血清有众多优点,但其最大劣势是稳定性差,主要原因如下:
- 来源不稳定:以胎牛血清为例,需严格控制其来源,确保牛群没有牛海绵状脑病。此外,根据《中国生物制品主要原辅料质控标准2000》,对牛血清的质量有严格的要求,包括蛋白质含量及微生物检测等。
- 组分不稳定:动物血清的成分复杂,且会因为性别、年龄、生理状态及营养条件而有所不同。这种成分的差异使得每个生产厂家的血清甚至同一厂家的不同批次之间都可能存在显著差异,从而影响实验结果。
- 使用不统一:实验中的操作习惯对结果有很大影响,比如冰箱解冻和水浴解冻的方式不同,可能导致细胞生存条件差异。此外,血清中包含的内毒素、抗体等有害成分可能对细胞生长产生负面影响。
应对血清不稳定性的策略
为了尽量解决血清的不稳定性问题,建议采取以下措施:
- 选择合适的培养基:如果条件允许,建议使用无血清培养基,尤其是对于资金充足的实验室。
- 减少血清品牌的更换:频繁更换不同厂家的血清可能会引入不必要的变量,尽量统一选择一种品牌。
- 储存策略:对于经过测试的高效血清,建议囤积同一批次,以新增20%作为储备,存放于-20°C或-80°C冷冻。
- 保持实验材料一致性:使用个人专用的培养基、PBS以及胰酶等,避免交叉污染,确保实验结果的一致性。
- 适应新血清:若必须更换血清,建议先在新血清中培养2-3代细胞,待细胞适应后再继续后续实验。
总的来说,尊龙凯时在细胞培养领域为科研人员提供了一系列高质量、稳定性优越的血清产品,有助于提高实验的可靠性和可重复性。